Фрагментация ДНК сперматозоидов: анализы

Содержание
  1. Что такое фрагментация ДНК в сперматозоидах, какой анализ ее выявляет и как вылечиться
  2. Общие сведения
  3. Причины фрагментации
  4. Диагностика
  5. Типы тестов и расшифровка результатов
  6. Лечение фрагментации ДНК сперматозоидов
  7. Заключение
  8. Фрагментация ДНК сперматозоидов (TUNEL-тест)
  9. Причины
  10. Показания к анализу
  11. Как проводится анализ
  12. Подготовка к TUNEL-тесту
  13. Расшифровка
  14. Лечение
  15. Днк сперматозоидов, анализ фрагментации и её индекс
  16. Фрагментация спирали ДНК
  17. Причины патологического нарушения
  18. Особенности спермограммы
  19. Методика TUNNEL
  20. Причины для беспокойства
  21. Фрагментация ДНК сперматозоидов и методы ее исследования
  22. Этиологические факторы
  23. Подготовка и проведение исследования
  24. Интерпретация тестирования
  25. Подготовительные мероприятия
  26. Лечение
  27. Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов: типы тестов, расшифровка, сдать анализ, цены
  28. Типы тестов и подготовка к исследованию
  29. Расшифровка результатов

Что такое фрагментация ДНК в сперматозоидах, какой анализ ее выявляет и как вылечиться

Фрагментация ДНК сперматозоидов: анализы

Фрагментация ДНК сперматозоидов – дефект содержащегося в ядре мужской половой клетки генетического материала. Это серьезная и сложно корректируемая патология.

При большом количестве таких сперматозоидов мужская сперма теряет фертильность (способность к оплодотворению). Даже современные методы искусственного оплодотворения (ЭКО и ИКСИ) зачастую оказываются бессильны.

Выявить фрагментацию ДНК можно при помощи специальных микробиологических исследований эякулята.

Общие сведения

Молекула ДНК, по сути, является генетической инструкцией. В ней закодирован путь развития и функционирования любого живого организма. В сперматозоиде ДНК упакованы в виде особого вещества – хроматина, которое находится в ядре (в средней части головки).

ДНК состоит из двух спирально свитых друг с другом нитей (полинуклеотидов), состоящих из звеньев (нуклеотидов).

Фрагментация – это ломка нитей, выпадение отдельных звеньев, вследствие чего нарушается генокод.

Подобные микроповреждения не всегда влияют на способность сперматозоида проникать в яйцеклетку, но за таким оплодотворением последует самопроизвольный аборт или патологии развития плода.

Сперматозоиды с фрагментацией ДНК могут повреждать яйцеклетку и при протоколе ЭКО. В результате она теряет функциональность, эмбрион не образуется, протокол оплодотворения оканчивается неудачно. Если уровень фрагментации ДНК невысок, то в некоторых случаях молодая и здоровая яйцеклетка может восстановить структуру цепочки.

Причины фрагментации

Механизмы, которые приводят к фрагментации нитей ДНК, до сих пор до конца не исследованы. Одной из наиболее вероятных версий считается окислительный стресс сперматозоидов − повреждение их мембран, белков и ДНК свободными радикалами (активный кислород – ROS, или АФК).

Последние являются продуктом обменных процессов в клетках, естественным компонентом среды, в которой вызревают сперматозоиды, и семенной плазмы. В норме радикалы нейтрализуются веществами-антиоксидантами, но в ряде случаев (при воспалительном процессе, иммунных нарушениях) баланс нарушается, активных форм кислорода становится слишком много.

Выявить наличие АФК можно при помощи ROS-теста.

Основные причины окислительного стресса, приводящего к фрагментации ДНК:

  • Хронические воспалительные процессы в органах малого таза: яичках, их придатках, простате, мочевом пузыре, даже в копчике (инфекция легко мигрирует с кровотоком, периодически активизируясь).
  • Варикоцеле – расширение вен мошонки, приводящее к застою крови и нарушению питания яичек.
  • Длительное воздержание (чем дольше сперматозоид находится в придатке яичка, тем выше вероятность его повреждения оксидантами).

Для чего применяется исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах и что такое TUNEL test рассказывает ведущий уролог-андролог урологического центра «Юнона» Малышевич Виктория Владимировна

  • Интоксикация (курение, алкоголь, пестициды, гербициды). Исследования (Mutat Res за 1996 г, № 351(2), стр. 199-203, Cancer Inst за 1997 г, № 89(3), стр. 238-244) выявили прямую зависимость между онкологическими заболеваниями у детей и курением их отцов (сперматозоиды которых подверглись окислительному повреждению ДНК).
  • Длительный прием медикаментов: препараты для лечения гипертонии, подагры, противосудорожные, метадон, некоторые антибиотики.
  • Аутоиммунные нарушения, при которых организм вырабатывает антитела против собственных половых клеток.
  • Злоупотребление кофе (более 300 г в день). Кофеин способен провоцировать повреждения ДНК и препятствовать восстановлению нитей.

Есть ли у вас вредные привычки?

  • Выпиваю и курю 27%, 196 196 – 27% из всех
  • 141 голос – 19% из всех
  • 140 – 19% из всех
  • 132 голоса – 18% из всех
  • Нет, веду здоровый образ жизни 17%, 125 125 – 17% из всех

У 40% мужчин с бесплодием выявляется повышенный уровень активных форм кислорода (Androl за 2012, №33(6), Fertil. Steril за 1995 № 64(4)), поэтому определение их уровня является важным этапом диагностики.

Диагностика

Оценку фрагментации ДНК спермограмма не дает. С помощью этого анализа невозможно определить качество генетического материала, который несет сперматозоид.

Даже расширенная версия с морфологией по Крюгеру позволяет обнаружить лишь внешние патологии головки (сперматозоиды с поврежденной цепью ДНК внешне могут ничем не отличаться от нормальных). Согласно исследованиям (https://www.sciencedirect.

com/science/article/pii/S1110569016300607)10% мужчин с совершенно нормальной спермограммой не могут иметь детей именно из-за фрагментации ДНК, но им диагностируют идиопатическое (без видимых причин) бесплодие.

Читайте подробнее: Что входит в расширенную спермограмму.

Тест на ДНК-фрагментацию позволяет парам выявить причину бесплодия и самопроизвольных абортов на ранних сроках. Анализ сперматозоидов на ДНК-фрагментацию перед ЭКО необходим для определения следующих параметров:

  1. Частота оплодотворения яйцеклетки.
  2. Качество предимплантационного развития эмбрионов.
  3. Вероятность развития врожденных пороков плода и выкидышей на ранних сроках.

В зависимости от результатов определяют целесообразность применения того или иного метода ЭКО.

Частота наступления беременности для пациентов с разной степенью фрагментации ДНК

Тест на ДНК-фрагментацию особенно актуален для мужчин, которые решили завести ребенка в позднем возрасте. После 45 лет риск окислительных повреждений сперматозоидов существенно увеличивается. В зоне повышенной опасности мужчины с артериальной гипертензией, сахарным диабетом, ожирением.

Типы тестов и расшифровка результатов

Исследование сперматозоида на наличие повреждений ДНК относится к области геномики и микробиологии. В андрологии и репродуктологии применяют следующие типы тестов:

  • TUNEL. Устаревший метод, который по-прежнему практикует большинство лабораторий. Для выявления пробелов в цепочке ДНК используется светооптический эффект. Отдельные нуклеотиды маркируются и помещаются в образец спермы. Там они находят сперматозоиды с поврежденными сегментами цепочек и встраиваются в них. Половые клетки с вклинившимися в ДНК нуклеотидами будут светиться, лаборантам остается вычислить их процент в общей массе. Результат будет готов через 2 недели (в некоторых лабораториях срок продлевается до трех).
  • HALO (HALOSPERM-тест, SCD). В отличие от предыдущего метода подсвечиваются не битые, а целые ДНК. Сперму смешивают с реактивом, в результате чего вокруг нормальных сперматозоидов образуется хорошо заметный ореол (на фото ниже). Метод считается наиболее чувствительным. Результат будет готов через 1-3 дня.
  • SCSA. Сперматозоиды просвечивают лазерным лучом, под воздействием которого они окрашиваются в зависимости от степени повреждений ДНК: зеленый – норма, желтый – несущественные повреждения, красный – серьезные дефекты. Референсное (среднее для здорового мужчины) значение – 20% (меньше – норма, больше – высокий уровень фрагментации).

Анализ ДНК методом HALO

Тест проводится только совместно со спермограммой. Некоторые лаборатории позволяют предоставить предыдущий результат анализа, выполненного не более двух дней назад. Подготовка к сдаче теста на фрагментацию такая же, как и перед обычной спермограммой.

Цены в популярных медучреждениях (по умолчанию указана стоимость методом TUNEL без учета цены спермограммы):

  • «ДНКом»: 8340 руб.;
  • «Инвитро»: 8620 руб.;
  • «Сперматест»: 6900 руб. за HALO, 7900 руб. за TUNEL.

По завершении исследования формируется протокол, где указывается индекс фрагментации – процентное соотношение между здоровыми и дефектными сперматозоидами (DNA Fragmentation Index (DFI)). Пример заключения и референсные значения:

Заключение теста ДНК-фрагментации, выполненного методом TUNEL

Интерпретация результатов исследования, выполненного методом HALO:

  1. 50%: потребуется отбор и искусственное введение сперматозоида в яйцеклетку (ИКСИ).
  2. > 60%: вероятность успешного протокола ИКСИ крайне низка, рекомендуется донорская сперма.

Для определения причин фрагментации назначают УЗИ органов малого таза, исследования спермы, простатического сока, крови и мочи на наличие инфекций.

Лечение фрагментации ДНК сперматозоидов

Методы лечения зависят от выявленной причины. Если БАК-посев или микроскопическое исследование показали наличие инфекции, то назначают курс антибиотиков. Варикоцеле, нарушение проходимости уретры, крипторхизм лечат путем хирургического вмешательства.

Уровень фрагментации ДНК можно снизить при помощи антиоксидантной терапии (Cochrane Database Syst Rev (сборник баз данных по медицине, «библиотека Кокрейна») 2011 г № 1, CD007411).

В центре вспомогательных репродуктивных технологий было выполнено пилотное исследование, в ходе которого было проанализировано 32 неудачных протокола ЭКО + ИКСИ (Источник: «Экспериментальная и клиническая урология», № 3 за 2017 г, стр. 70-76).

У мужчин диагностирована низкая фертильность спермы: олигоастенотератозоспермия (малоподвижные сперматозоиды с нарушенным строением) при высоком уровне фрагментации ДНК (более 30%). Средние значения фрагментации и АФК были 38% и 4,6 соответственно.

Пациентам была предложена антиоксидантная терапия, включающая ежедневный прием следующих препаратов:

  • Селен (100 мг);
  • L-карнитин (3000 мг);
  • Витамины группы Е (токоферолы и токотриенолы в количестве 400 МЕ).
  • Витамин С (1000 мг).

Препараты-антиоксиданты в таблетках и капсулах

Курс лечения продолжался 12 недель, в течение которых пациентам был рекомендован регулярный секс с использованием презервативов. По истечении 12 недель пары вступили в повторный протокол ЭКО. Результаты:

  1. Повышение концентрации сперматозоидов, увеличение количества подвижных и морфологически нормальных (рисунки 1, 2, 3).
  2. Снижение уровня ДНК-фрагментации до 23% (рисунок 4).
  3. Уменьшение количества АФК до 4,1 (рисунок 5).

После лечения у 47% пар произошло успешное оплодотворение и родоразрешение (дети были выношены и рождены здоровыми).

Рисунок 1. Концентрация после леченияРисунок 2. Подвижность после леченияРисунок 3. Процент нормальных сперматозоидовРисунок 4. Уровень фрагментации ДНКРисунок 5. Уровень активного кислорода (АФК)

Еще один вариант лечения:

  1. Витамин С (500 мг).
  2. Фолиевая кислота (2 мг).
  3. Витамин Е (400 МЕ).
  4. Селен (25 мг).
  5. Цинк (26 мкг).
  6. L-карнитин (2000 мг).

В рамках антиоксидантной терапии можно принимать биоактивные препараты: «Спермактин», «Синергин», «Профертил», «Сперотон».

Антиоксиданты содержатся в продуктах питания:

  • Любые ягоды (лучше клюква или смородина);
  • Зелень листовая;
  • Орехи (лидируют пекан и грецкие);
  • Бобовые (красная фасоль);
  • Сухофрукты (сушеные груши, агава, яблоки);
  • Овощи (корень имбиря, артишоки, чеснок);
  • Какао-порошок, черный шоколад.

Из специй больше всего антиоксидантов содержит гвоздика и корица. В небольших количествах полезно красное сухое вино.

Для уменьшения степени фрагментации ДНК прежде всего следует скорректировать образ жизни: рациональное питание, физическая активность, регулярные эякуляции, снижение веса.

Заключение

Тест на фрагментацию ДНК – это дорогой, но очень информативный тип исследования. Многие пары годами несут гораздо более крупные финансовые потери из-за бесполезного лечения и бесплодных попыток ЭКО.

В лабораториях следует уточнять, каким именно методом проводится анализ.

Наиболее точным и быстрым является HALO-тест, но он доступен далеко не везде и не всеми андрологами назначается (по причине недостаточной осведомленности).

Источники:

Сохранить себе или поделиться:

Оцените пользу информации:

(1 5,00 из 5)
Загрузка…

Источник: https://Muzhchina.info/fertilnost/fragmentaciya-dnk-spermatozoidov

Фрагментация ДНК сперматозоидов (TUNEL-тест)

Фрагментация ДНК сперматозоидов: анализы

Под фрагментацией ДНК сперматозоидов следует понимать нарушение целостности их цепочек. Чем сильнее повреждения, тем хуже качество генетического материала, следовательно, низкая вероятность наступления оплодотворения.

Если повреждения несущественны, яйцеклетка в состоянии устранить их самостоятельно. Это зависит от характера фрагментации, количества поврежденных участков, качества самой яйцеклетки (обычно ее определяет возраст и состояние репродуктивного здоровья женщины).

Причины

Причины нарушения ДНК бывают двух типов: внешние и внутренние. Внутренние это:

  • Сбой механизма отбраковки. У здоровых мужчин непригодные к оплодотворению сперматозоиды, вырабатываемые семенниками (тестикулами), устраняются. Но если функционирование механизма нарушено, они попадают в сперму, снижая ее качество и способность к зачатию.
  • Нарушение процесса вызревания. Созревают сперматозоиды в придатках яичек, в ходе вызревания происходит конденсация хроматина ядра клеток, отвечающая за активность сперматозоидов. Если процесс протекает с отклонениями, это становится причиной фрагментации их ДНК.

Внешние:

  • Прохождение лечения химио- и рентгенотерапией.
  • Повышенная температура тела.
  • Варикоз сосудов семенного канатика.
  • Высокотемпературные воздействия.
  • Наличие хронических заболеваний, воспалений, инфекций.
  • Оксидативный стресс при переходе через эпидидимий. Повреждения вызывают свободные радикалы, либо сперматозоиды выходят невызревшими.

Также нарушение цепочки ДНК вызывают токсины, прием антибиотиков, заболевания мочеполовой системы, вредные привычки.

Показания к анализу

Чтобы выявить разрыв ДНК-цепочки сперматозоидов, проводится специальный тест. Спермограмма в данном случае неинформативна. Она показывает только концентрацию сперматозоидов в эякуляте, их активность. Тест на фрагментацию показан:

  • при мужском бесплодии, если отсутствуют другие провоцирующие его факторы;
  • если попытки искусственного оплодотворения не дали результата;
  • повторяющиеся выкидыши;
  • если эмбрион плохого качества;
  • мужчинам в возрасте от 45 лет;
  • после криохранения образца спермы перед ЭКО (экстракорпоральным оплодотворением);
  • при варикозе сосудов семенного канатика;
  • если в течение трех месяцев имела место повышенная температура тела.

Также процедуру должны пройти мужчины, работающие в условиях повышенной вредности.

Как проводится анализ

Для проверки целостности ДНК спермы проводится tunel-тест, предполагающий микроскопическое исследование сперматозоидов. Образец спермы пациент должен собрать в специальный стерильный контейнер с крышкой.

Важно! Презерватив не подходит для этой цели, так как компоненты, входящие в его состав, могут оказать негативное влияние на подвижность сперматозоидов.

Также при транспортировке емкости с генетическим материалом необходимо соблюдать температурный режим, составляющий диапазон температур в пределах +27 до +37 градусов Цельсия.

Чтобы получить точный результат, анализ должен быть проведен в течение часа с момента забора образца. Для этого лаборант добавляет в эякулят реактив. Он, вступая в реакцию с семенной жидкостью, заполняет разрывы ДНК флуоресцирующим нуклеотидом, делая видимыми фрагментированные сперматозоиды. Лаборант проводит их подсчет, который указывается в процентах.

Для получения полной картины параллельно проводится электронно-микроскопическое исследование и спермограмма.

Подготовка к TUNEL-тесту

Чтобы тест был максимально точным, перед сдачей образца необходимо в течение 2-7 дней: воздержаться от половых контактов, приема лекарственных препаратов, посещения бань. Важно соблюдать режим питания, избегать употребления алкоголя, не курить. Перед забором спермы нужно освободить мочевик.

При повторных проведениях анализа рекомендуется соблюдать последовательность и длительность подготовительных мероприятий, так как это может повлиять на результат.

Расшифровка

После анализа выдается результат с индексом теста и снимок, на котором зафиксированы фрагментированные сперматозоиды. Индекс – это соотношение между поврежденным и здоровым, способным к оплодотворению, генетическим материалом.

В норме показатель не должен быть выше 15%. Это говорит о том, что спермиев с разрушенной цепочкой ДНК меньше, чем здоровых, поэтому репродуктивное здоровье мужчины в порядке и существует высокая вероятность естественного зачатия.

При индексе выше 15%, но ниже 30% сохраняется возможность оплодотворения яйцеклетки естественным способом, но для этого может потребоваться много времени.

Если количество поврежденных сперматозоидов в эякуляте составляет 30-50%, специалисты считают, что наступление беременности естественным путем маловероятно, поэтому рекомендуют ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение), внутриматочную инсеминацию (репродуктивная методика, предполагающая введение здоровых, полученных и отобранных заранее сперматозоидов в цервикальный канал) или ИКСИ.

Так, при показателе индекса более 30%, врачи-репродуктологи рекомендуют проводить ЭКО. Если фрагментированный генетический материал составляет 50% и выше, экстракорпоральное оплодотворение малоэффективно. Целесообразно применять интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ИКСИ). При индексе 60% и больше, шансы на успешное оплодотворение минимальны.

Проводится ИКСИ, либо берется донорская сперма.

Лечение

Еще недавно отсутствовала возможность выявить поврежденные сперматозоиды, не говоря о том, чтобы это лечить. Сегодня эта проблема поддается лечению. Внедрение инновационных медицинских методик позволяет успешно восстанавливать фрагментированную ДНК сперматозоидов.

Для этого следует устранить или ограничить воздействие факторов, провоцирующих мужское бесплодие: лишний вес, вредные привычки (курение, алкоголь), воздействие токсических, химических веществ (работа на вредных производствах).

Второй этап – комплексная диагностика, устранение различных воспалительных процессов в организме, в том числе заболеваний репродуктивной системы мужчины. Параллельно проводится лечение антибактериальными, противовоспалительными медпрепаратами (при необходимости).

Обязательно назначаются витаминные комплексы, антиоксиданты, позволяющие восстановить мужское здоровье и способствующие формированию здоровых сперматозоидов.

Длительность лечения может составлять 3-6 месяцев. Иногда может понадобиться больше. Если терапия оказалась малоэффективной, и количество здоровых сперматозоидов не превышает 20-30%, врачи предлагают паре услугу ИКСИ. Так, из эякулята репродуктологи искусственным путем отбирают здоровый, способный к оплодотворению, генетический материал. Затем его подсаживают в яйцеклетку женщины.

В случае большого количества спермиев с фрагментированным ДНК, также проводиться операция по извлечению их непосредственно из яичек. Это обусловлено тем фактом, что во время эякуляции повышается процент поврежденных клеток.

Влияет ли прием лекарств на анализ на фрагментацию ДНК?
На фрагментацию ДНК влияет прием некоторых лекарственных средств и химиопрепаратов.

Как улучшить фрагментацию ДНК?
Сначала необходимо разобраться в возможных причинах фрагментации и затем убрать ее причину, если это возможно.

Источник: https://KRMed.ru/articles/fragmentacia_dnk_spermatozoidov.html

Днк сперматозоидов, анализ фрагментации и её индекс

Фрагментация ДНК сперматозоидов: анализы

Согласно последним статистическим данным, средний показатель бесплодия в мире составляет 15%. Каждая восьмая пара испытывает проблемы с зачатием первенца. У каждой шестой возникают сложности с рождением последующих детей. В 50% это случается из-за повреждения генетического материала. Если показатели спермограммы нормальные, есть смысл пройти анализ фрагментации ДНК сперматозоидов.

Фрагментация спирали ДНК

Сперматозоид — это самая мелкая клетка в организме человека, состоящая из головки и хвостика. задача мужской половой клетки — быстро добраться к яйцеклетке, внедриться в неё и поделиться генетической информацией.

Важнейший показатель качества сперматозоидов — это целостность генетической структуры. Фрагментацией называется нарушение структуры спирали ДНК. Из-за этого происходит повреждение информации, которую несёт в себе половая клетка мужчины. Что, в свою очередь, существенно снижает вероятность нормального развития зародыша.

Одна из основных причин этой неприятной патологии — пониженный синтез транспортных белков — протаминов. Они содержатся в хромосомах и выполняют очень важную защитную функцию, предохраняя ДНК от агрессивных внешних факторов.

Половые клетки, имеющие фрагментацию ДНК, на анализе спермограммы не обнаруживаются, ведь они ничем внешне не отличаются от своих здоровых собратьев и способны к оплодотворению яйцеклетки. Однако из-за повреждённого генетического материала происходят многочисленные сбои уже на ранних стадиях развития плода. Обычно всё заканчивается выкидышем или замершей беременностью.

Важно понимать, что повреждённые сперматозоиды — это бракованный материал, не подлежащий восстановлению. Невозможно искусственно провести дефрагментацию ДНК.

Спермограмма не может выявить эту патологию, для этих целей разработана современная методика под названием TUNNEL. К сожалению, далеко не все пары, страдающие от бесплодия, знают об этом методе изучения половых клеток.

В некоторых случаях, если нарушения в цепочке генов не слишком масштабные, целостность возвращается природным путём. Яйцеклетка восстанавливает структуру мужской ДНК при помощи своего генетического материала. Однако это встречается довольно редко.

Причины патологического нарушения

Существуют две внутренние причины, способные вызвать нарушение целостности ДНК в сперме. Первая — это сбои в процессе образования семенной жидкости. Дело в том, что сперматозоиды созревают в придатках мужских яичек.

Одновременно с этим происходит активизация хроматинового комплекса, состоящего из молекул ДНК и специфических белков в ядрах клеток.

Случается, что этот процесс идёт не так, как положено, в результате происходят многочисленные повреждения генетических цепочек.

В половой системе у мужчин есть природный механизм контроля половых клеток. Каждый сперматозоид проверяется на соответствие стандарту. В случае выявления каких-либо отклонений в строении или в качестве наследственного материала, он выбраковывается и немедленно уничтожается.

Случается, что эта защитная система работает неправильно. Может наблюдаться такое явление: когда здоровые экземпляры не проходят контроль и организм от них избавляется, а дефективный материал допускается к участию в оплодотворении. Сперма мужчины с этой патологией неполноценна, так как содержит смесь из повреждённых и здоровых клеток.

Кроме внутренних факторов развития патологии, существует несколько внешних причин:

  1. Острые и хронические заболевания, особенно перенесённые без соответствующей медицинской помощи и не долеченные до конца.
  2. Воспалительные процессы, локализованные в мочеполовой системе, могут очень активно повлиять на репродуктивные свойства человека.
  3. Многие представители сильного пола страдают от варикозного расширения вен, оплетающих яички (варикоцеле). Это распространённое заболевание является главной причиной бесплодия у мужчин. Патологию легко выявить при самостоятельном осмотре, а также по характерным симптомам.
  4. Высокая температура без каких-либо видимых причин, которая длится довольно долго и не проходит.
  5. Оксидативный стресс — множественные повреждения клеток в результате их окисления.
  6. Длительное воздействие ионизирующего излучения, например, рентгеновские лучи.
  7. Курс химиотерапии.
  8. Чрезмерное употребление алкоголя и прочие вредные привычки.

Особенно губительно воздействие курения. Это доказано многими исследованиями.

Сейчас существует немало методик для избавления от этой вредной привычки. Будущему отцу желательно отказаться от употребления никотина за 2−3 месяца до зачатия.

Особенности спермограммы

Грамотное планирование семьи обязательно включает в себя проверку качества мужской спермы. Для рождения полноценного здорового ребёнка требуется соответствующий генетический материал. Это поможет сделать стандартный анализ — спермограмма.

Параметры проверки мужского семени:

  • концентрация;
  • строение;
  • подвижность;
  • соответствие определённым нормам;
  • кислотность;
  • содержание лейкоцитов;
  • цвет;
  • запах.

Здоровая сперма должна быть белой или кремовой, допускается розовый оттенок. Запах чем-то напоминает каштан.

В результате этого теста можно определить причину проблем с оплодотворением. Если спермограмма не выявила никаких патологий, а зачать ребёнка не выходит — причина кроется именно в нарушениях ДНК.

Методика TUNNEL

Недостаток спермограммы в том, что исследуются только внешние свойства сперматозоида. Классический анализ не способен определить качество наследственной информации.

Для того чтобы выявить фрагментацию ДНК, придётся воспользоваться более точными и продвинутыми методиками.

Наиболее совершенная на сегодняшний день техника исследования семенной жидкости, которая позволяет с большой точностью определить процентное содержание фрагментированных сперматозоидов, это — TUNNEL.

Правила для проведения анализа:

  • в течение недели нельзя принимать горячую ванну;
  • походы в сауну и баню также исключаются;
  • половое воздержание и отказ от алкоголя на тот же период;
  • сбор эякулята в день проведения процедуры, используется специальная пластиковая ёмкость.

Для проведения анализа собранный эякулят подвергают воздействию специальных реактивов, в результате чего дефективные клетки начинают существенно отличаться от здоровых. Полученный таким образом препарат попадает под микроскоп, где тщательно исследуется опытным медицинским специалистом.

Исследователь сразу же выявляет наличие клеток с фрагментированной ДНК. Их количество подсчитывается и вычисляется соотношение здоровых и больных экземпляров.

Индекс фрагментации:

  1. До 15% — норма. Оплодотворению ничего не мешает и беременность должна наступить природным путём.
  2. От 15 до 25% — зачатие возможно, но придётся подождать.
  3. Начиная от 30% вероятность забеременеть естественным способом снижается, может потребоваться процедура искусственного оплодотворения — ЭКО.
  4. Если фрагментировано более 50% сперматозоидов, самостоятельно зачать не получится. ЭКО тоже не всегда помогает. Наилучший вариант в такой ситуации — это интрацитоплазматическая инъекция (ИКСИ).
  5. Если повреждено более 60% половых клеток, поможет лишь донорская семенная жидкость.

Результат исследования выдаётся пациенту в виде фотографии с описанием, в нём указывается процентное содержание повреждённых клеток. Врач даёт пациенту подробные рекомендации для успешного зачатия ребёнка.

Пройти анализ на фрагментацию можно почти в любой государственной клинической лаборатории, оборудованной современной аппаратурой. Процедура проводится бесплатно, а результат можно получить уже через несколько дней. Для создания более целостной картины и получения точных данных рекомендуется сделать несколько тестов.

Некоторые частные лаборатории выдают результат исследования в тот же день. Цена такого удовольствия в столице составит 5−10 тыс. рублей.

Причины для беспокойства

К сожалению, многие мужчины не подозревают о своём бесплодии, предпочитая сваливать всё на женщин. Далеко не каждый пойдёт сдавать спермограмму, а про исследование дефрагментации ДНК кое-кто даже и не слышал. Всё это способствует всеобщему росту бесплодия в стране.

Существует несколько основных признаков, которые должны насторожить представителей мужского пола, а также навести на мысль о походе к врачу.

Причины для беспокойства:

  • несмотря на все старания в течение нескольких лет зачатие ребёнка не происходит;
  • опыт неуспешного искусственного оплодотворения;
  • выявление патологий эмбриона на ранних стадиях развития;
  • частые случаи выкидыша у жены без видимых на то причин и каких-либо патологий репродуктивной системы;
  • расширенные вены на яичках и семенном канатике;
  • повышенная температура тела на протяжении нескольких месяцев.

Безусловно, все эти признаки ещё не означают, что у мужчины проблемы с ДНК сперматозоидов. Необходим осмотр врача, он назначит все необходимые исследования, на основе которых поставит правильный диагноз.

Действенных методов коррекции дефрагментированной ДНК в мужских половых клетках, к сожалению, пока не найдено. Но поиски решения проблемы постоянно ведутся. Проводятся многочисленные исследования.

Недавно выяснилось, что введение в организм веществ с антиоксидантными свойствами способствует уменьшению количества повреждённых генетических цепочек.

Однако, если нарушения вызваны токсинами или высокой температурой, положительного результата не наблюдается.

Ещё одно открытие основано на наблюдении за образом жизни и питанием большого количества мужчин. В результате этого исследования выяснилась взаимосвязь между потреблением фолиевой кислоты и образованием повреждённых клеток. Диета с низким содержанием витамина В9 способствует повышению риска фрагментации в спиралях ДНК.

Поделитесь с друзьями и оцените публикацию.Вам не трудно, а автору приятно.

Спасибо.

Источник: https://manbe.ru/muzhskie-bolezni/dnk-spermatozoidov-analiz-fragmentatsii-i-eyo-indeks.html

Фрагментация ДНК сперматозоидов и методы ее исследования

Фрагментация ДНК сперматозоидов: анализы

Фрагментация ДНК сперматозоидов представляет собой патологическое состояние, при котором активность сперматозоидов может быть не нарушена, однако они все равно не могут оплодотворить яйцеклетку по той причине, что генетический материал в них поврежден.

Данное явление — актуальная проблема, так как по статистике приблизительно 20%-ов случаев беременности заканчиваются:

  • неблагополучно;
  • прерыванием;
  • отсутствием формирования эмбриона.

Факторы такого прохождения беременности могут состоять как в общем здоровье обоих партнеров, так и в качестве семени мужчины (спермы). Разрушение целостности хромосом в сперматозоидах приводит к дроблению ДНК, и даже если сперматозоид оплодотворяет яйцеклетку, то развитие эмбриона останавливается.

Процентное содержание клеток с нарушением ДНК в сперме варьируется в зависимости от здоровья мужчины. У здоровых партнеров, которые сдавали анализы, содержание спермиев с фрагментированной ДНК составляет менее 15%-ов.

Если количество сперматозоидов с нарушенной ДНК составляет 15-20%-ов, то значительно снижается вероятность беременности. При нарушениях более 30%-ов можно уже говорить о клиническом случае бесплодия.

Этиологические факторы

К причинам фрагментации ДНК в сперматозоидах можно отнести как ряд внутренних факторов, представленные:

  • недостаточным созреванием клеток;
  • нарушение естественного процесса отбора сперматозоидов,

так и внешних:

  • варикоцеле;
  • последствия химиотерапия;
  • радиационное воздействие;
  • инфекционно-воспалительные процессы;
  • ведение нездорового образа жизни:
  • употребление алкогольных напитков;
  • табакокурение;
  • стрессы и перегрузки;
  • плохая экологическая обстановка.

Наилучшим для зачатия является полностью сформировавшийся сперматозоид. Согласно приведенной таблице частота патологии беременности напрямую зависит от качества семенного материала.

Фрагментация ДНК (%)Менее 20Более 20
Количество исследуемых9258
Беременности (количество)4417
Беременности (%)47,829,3
Спонтанные аборты/замершие беременности (%)18,223,5

Зависимость качества семенной жидкости и частоты возникновения расстройств во время беременности

Подготовка и проведение исследования

Анализ фрагментации ДНК сперматозоидов осуществляется специфическими методами, потому что рядовая спермограмма не может определить величину нарушенного генетического материала. Один из актуальных анализов — исследование фрагментации ДНК (дробления) методом tunel. Для проведения процедуры мужчине необходимо сдать семенной материал.

Исследование осуществляется в лаборатории и состоит в том, что к исследуемому материалу присоединяют специальные реактивы, окрашивающие поврежденные сперматозоиды. Микроскопирование разрешает установить соотношение пораженных и здоровых клеток. Данные о количестве сперматозоидов с фрагментацией ДНК позволяют врачу определить методику лечения.

Tunel-тест может быть назначен при:

  • бесплодии невыясненной этиологии;
  • частых прерываниях беременности;
  • варикоцеле;
  • частых безуспешных попытках проведения экстракорпорального оплодотворения (ЭКО);
  • после криозаморозки семенной жидкости, длительной лихорадки, возрасте старше 45-ти лет.

Интерпретация тестирования

Результаты исследования показывают следующее:

  • менее 15%-ов — существует возможность оплодотворения, хорошее процентное содержание спермиев;
  • 15-25%-ов — есть возможность оплодотворения, но необходимо время, либо процедура ЭКО;
  • более 30%-ов — необходимо ЭКО;
  • более 50%-ов — ИКСИ (Intra Cytoplasmic Sperm Injection — введение сперматозоида в цитоплазму ооцита);
  • более 60%-ов — ИКСИ, либо донор спермы.

Подготовительные мероприятия

Подготовка к исследованию методом tunel включает в себя:

  • воздержание от половых контактов в течении 3-4-х дней;
  • отказ от вредных привычек не менее чем за неделю до исследования;
  • отказ от перегрева (посещения бань, саун);
  • консультация специалиста по вопросам приема лекарственных средств.

Данное тестирование обладает хорошей информативностью, позволяющей медику выбрать оптимальное лечение. Цена исследования также является приемлемой для многих слоев населения.

Лечение

Высокий уровень содержания поврежденных сперматозоидов в семенной жидкости говорит о необходимости лечения, в зависимости от этиологии. Определение вариантов лечения выбирается специалистом в зависимости от присутствующих заболеваний. Прежде всего, необходимо устранить негативные факторы:

  • курение;
  • алкоголь;
  • ожирение;
  • токсические поражения.

Если присутствуют инфекционно-воспалительные патологии, варикоцеле, то их следует лечить. Повысить устойчивость организма к инфекциям, провести антиоксидантную и витаминотерапию. Также яйцеклетка обладает способностью в некоторых случаях восстанавливать поврежденную ДНК сперматозоида, если повреждения не слишком сильные.

Эта функция напрямую зависит от состояния яйцеклетки и ее возраста, а также от величины повреждений ДНК сперматозоида.

Если при проведении лечения и вторичном тесте на дробление (фрагментацию) ДНК сперматозоидов аномальные клетки повышены, то специалист может предложить провести процедуру ИКСИ.

Процедура заключается в определении неповрежденной клетки и вводе ее непосредственно в яйцеклетку, что отличается от процедуры ЭКО.

Отбор неповрежденной клетки осуществляется путем погружения в гиалуроновую кислоту, с которой неповрежденный спермий образует связь, и соответственно специалист точно определяет какую клетку необходимо применять при проведении процедуры.

Фрагментация ДНК сперматозоидов — патологическое явление, поддающееся многоступенчатой диагностике, в определенных случаях коррекции, и в случае невозможности оной, проведения специальных процедур для нивелирования проблемы оплодотворения и развития здоровой беременности.

Источник: http://AndrologMed.ru/diagnostika/fragmentaciya-dnk-spermatozoidov

Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов: типы тестов, расшифровка, сдать анализ, цены

Фрагментация ДНК сперматозоидов: анализы

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов

Цена 7000 руб

Адрес лаборатории: Москва, ул. Беговая, д. 7 стр. 2

Запись по телефону: +7 (495) 772-13-20

Одной из причин мужского бесплодия является нарушение целостности цепочек ДНК, в которых заложена генетическая информация о будущем ребенке. В эякуляте каждого мужчины содержится определенный процент сперматозоидов с поврежденной ДНК.

Если уровень фрагментации ДНК сперматозоидов находится в норме (не превышает порогового значения в 15%), вероятность зачатия высока, и пара радуется наступившей беременности, даже не подозревая о возможных проблемах. Но вдруг что-то идет не так, и беременность прерывается.

Если это происходит раз за разом, обоим партнерам необходимо пройти обследование.

Нарушение целостности структуры нуклеиновых цепочек приводит к образованию обрывков молекулы ДНК, что и называется фрагментацией. Чем выше содержание сперматозоидов с фрагментацией ДНК, тем меньше шансов на естественное зачатие. В случае если оно все же произошло, велика вероятность развития у ребенка онкологических заболеваний и генетических нарушений.

Типы тестов и подготовка к исследованию

Для оценки фрагментации ДНК разработано несколько видов тестов. Наиболее популярные из них следующие:

  • TUNEL-тест. Для выявления повреждений нуклеиновых цепочек используется оптический эффект. Образец спермы смешивается с энзимом, маркированные нуклеотиды которого встраиваются в поврежденные сегменты цепочек. Поврежденные сперматозоиды приобретают окраску (при исследовании по методу светлого поля) или подсвечиваются (при флуоресцентном методе), после чего их можно подсчитать и вычислить индекс фрагментации – процент поврежденных клеток по отношению к общему количеству. Референсное значение для tunel-теста составляет 15%;
  • HALOSPERM-тест (метод SCD). Основное отличие от предыдущего метода состоит в подсчете клеток не имеющих повреждений. Тест отличается высокой чувствительностью;
  • SCSA-тест. Клетки подсвечиваются лазерным лучом и в зависимости от степени повреждений приобретают характерную окраску: зеленый — повреждений нет, желтый — незначительные нарушения, красный — серьезные дефекты. Референсное значение составляет 20%.

Забор материала для исследования производится так же, как и для обычной спермограммы, методом мастурбации. Чтобы результаты были максимально точными, рекомендуется сдавать сперму в клинических условиях в стерильную посуду.

При подготовке к тесту нужно соблюсти несколько условий:

  • соблюдать воздержание 3–5 дней;
  • отказаться от приема алкоголя и сильнодействующих веществ;
  • не рекомендуется посещать баню или сауну, а также проводить долгое время на пляже. При следовании в лабораторию в автомобиле не следует пользоваться функцией подогрева сиденья;
  • желательно избегать стрессовых ситуаций;
  • не следует проводить исследование, если в течение предшествующих двух недель приходилось принимать антибиотики;
  • после перенесенного заболевания, сопровождающегося повышением температуры, желательно выждать не менее двух недель.

Расшифровка результатов

Результат исследования оформляется в табличной форме, где приведен полученный результат в процентах и указано референсное значение для данного вида теста.

Для TUNEL-теста расшифровка выглядит следующим образом:

  • низкая степень фрагментации ДНК сперматозоидов (15–30%) — зачатие возможно, хотя и затруднено;
  • фрагментация ДНК сперматозоидов повышена незначительно и составляет 30–50% — естественное зачатие маловероятно, но хорошие результаты прогнозируются для ЭКО;
  • 50–60% — возможно только искусственное зачатие с невысокой степенью вероятности;
  • более 60% — зачатие при помощи собственного семенного материала маловероятно.

Ниже приведена интерпретация результатов HALO-теста:

  • степень фрагментации ДНК сперматозоидов менее 20% — вероятность естественного зачатия высокая;
  • 20–30% — вероятность зачатия стабильна, но есть риск замирания беременности и выкидыша;
  • 30–50% — естественное зачатие маловероятно, рекомендуется прибегнуть к процедуре ЭКО;
  • 50–60% — рекомендуется процедура ИКСИ;
  • повышенное содержание сперматозоидов с фрагментацией ДНК более 60% — рекомендуется воспользоваться донорской спермой.
Хороший врач
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: